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小鼠肠系膜平滑肌细胞

简要描述:产品可保小鼠肠系膜平滑肌细胞的生长状态。本产品中已包含小鼠肠系膜平滑肌细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于小鼠肠系膜平滑肌细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用,不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其它用途。

  • 产品型号:GOY-01X1402
  • 厂商性质:科研
  • 更新时间:2023-10-24 00:00:00
  • 访  问  量:192

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小鼠肠系膜平滑肌细胞

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产品名称:小鼠肠系膜平滑肌细胞

货号:GOY-01X1402

分类:原代细胞

2.组织来源:肠系膜组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:小鼠肠系膜平滑肌细胞分离自肠系膜动脉组织;肠道指的是从胃幽门至门的消化管。肠是消化管中长的一段,也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经门排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内的微生态系统。肠系膜动脉由背大动脉发出的走行在肠系膜内,分布于消化管的动脉。分成肠系膜上动脉和肠系膜下动脉。前者主要分布于小肠左侧,后者分布于结肠、大肠、泄殖腔等处。肠动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。

5.方法简介:公司实验室分离的小鼠肠系膜平滑肌细胞采用-胶原酶联合消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:公司实验室分离的小鼠肠系膜平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息: 培养基 含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传2-3代左右 培养条件 气相:空气,95%CO25%



培养操作

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小鼠肠系膜平滑肌细胞1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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