小鼠腓肠肌细胞

简要描述：产品可保小鼠腓肠肌细胞的生长状态。本产品中已包含小鼠腓肠肌细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于小鼠腓肠肌细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用，不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其它用途。

产品型号：GOY-01X1418
厂商性质：科研
更新时间：2023-10-24 00:00:00
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小鼠腓肠肌细胞

产品名称：小鼠腓肠肌细胞

货号：GOY-01X1418

分类：原代细胞

2.组织来源：骨骼肌组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：小鼠腓肠肌细胞分离自小腿肌肉组织；腓肠肌位于小腿后面的皮下，是一个浅表的肌肉，当人体站立时，可以在小腿后面看到隆起肌肉的轮廓就是腓肠肌。腓肠肌为小腿后侧群浅组肌肉，有内、外二头，内侧头起自股骨内侧髁上的三角形隆起，外侧头起自股骨外侧髁的近侧端，在二头的深面各有一滑膜囊。腓肠肌的二肌腹增大，在腘窝下角彼此邻近，所成夹角多为25°～30°，此肌下行与比目鱼肌移行为跟腱，止于跟骨结节。腓肠肌的动脉发自腘动脉、静脉与动脉伴行，注入腘静脉或小隐静脉。腓肠肌的神经全部来自胫神经。包括内、外侧肌神经。腓肠肌在行走及站立时能提足跟向上，直立时，腓肠肌和比目鱼肌都参加强固膝关节，并调节小腿和足的位置。胫前皮肤缺损或深部窦道及瘢痕，可以切取腓肠肌内侧头及其皮面皮肤所形成的肌皮瓣向前旋转。腓肠肌还可影响足的纵弓，该肌瘫痪或萎缩时，足纵弓将加深。该肌由胫神经支配，股骨髁上骨折时，因腓肠肌收缩远侧端常自后移位。腓肠肌是胫骨和腓骨后面的一块肌肉。腓肠肌细胞属于骨骼肌细胞的一种，骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

5.方法简介：公司实验室分离的小鼠腓肠肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：公司实验室分离的小鼠腓肠肌细胞经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：包被条件 PLL（0.1mg/ml）培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等换液频率每2-3天换液一次生长特性贴壁细胞形态成纤维细胞样传代特性可传3-5代左右培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

培养操作：

小鼠腓肠肌细胞1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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