高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白(Human，人)

简要描述：高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

产品型号：GOY-01D03
厂商性质：科研
更新时间：2023-10-24 00:00:00
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产品名称：高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白(Human，人)

物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1
型号：GOY-01D03

物种	Homo sapiens (Human，人)
来源	原核表达
宿主E.coli内毒素水平	<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位	分泌, 细胞质
预测分子量	47.2kDa
实际分子量	47kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签	Gly204~Leu364 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份	20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性状	冻干粉纯度：> 90%
等电点	6.6

应用	Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格	10μg50μg200μg1mg5mg

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1．高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3．取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4．取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5．分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1．贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2．悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3．在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4．细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）

7．分装保存于-70℃,避免反复冻融

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