过氧化氢酶(CAT)天然蛋白(Cattle，牛)

简要描述：过氧化氢酶(CAT)天然蛋白(Cattle，牛)缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

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详细介绍

产品名称：过氧化氢酶(CAT)天然蛋白(Cattle，牛)

物种：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名称：Native Catalase (CAT)

型号：GOY-01D3196

物种	Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)
来源	天然提取
宿主	E.coli
亚细胞定位	分泌
预测分子量	60kDa
实际分子量	60kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签
缓冲液成份	磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状	冻干粉
纯度	> 90%
内毒素水平
等电点
应用	Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格	10μg50μg200μg1mg5mg

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1．过氧化氢酶(CAT)天然蛋白(Cattle，牛)在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3．取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4．取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5．分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1．贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2．悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3．在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4．细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）

7．分装保存于-70℃,避免反复冻融

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