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Caco-2 (人结直肠腺癌细胞)

简要描述：Caco-2 (人结直肠腺癌细胞)注意事项 1. 细胞贴壁慢特别是刚复苏时，一般两到三天贴壁展开，会有空泡； 2. 细胞在传代细胞中注意消散，不然难贴壁； 3. 成团生长，细胞密度越大，表面空泡黑点越多； 4. 一般细胞长至80%传代，细胞成片，其实密度很大； 5. 细胞生长太满对细胞状态影响严重，传代后易碎，死亡； 6. 细胞生长时间越久，消化难度也会随之增加；消化到轻拍培养瓶侧边细胞可以滑落的时候可以终止。　

产品型号：GOY-01X0050　
厂商性质：科研
更新时间：2023-10-24 00:00:00
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详细介绍

公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！

产品名称	规格	货号
Caco-2 (人结直肠腺癌细胞)	1×10⁶/T25培养瓶	GOY-01X0050

商品详情：

名称；Caco-2 (结直肠腺癌细胞) (STR鉴定正确)

别称 CaCo-2; CACO-2; Caco 2; CACO 2; CACO2; CaCo2; CaCO2; Caco2; Caco-2/ATCC

种属人类

年龄（性别）男性，72岁

组织来源结肠，结直肠腺癌

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

背景描述 Caco-2细胞分离自直肠原位癌；当长到满时，Caco-2细胞表现出特征性的肠上皮细胞分化。Caco-2细胞表达维甲酸结合蛋白I和维甲酸结合蛋白Ⅱ，并呈角质蛋白阳性。

生物安全等级 1

生长培养基 MEM＋20% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~60-80小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms moderately well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade II).

受体表达情况 This cell line expressed heat stable enterotoxin (Sta, E. coli) and epidermal growth factor (EGF).

基因表达情况 keratin, retinoic acid binding protein 1, retinol binding protein 2

注意事项 1. 细胞贴壁慢特别是刚复苏时，一般两到三天贴壁展开，会有空泡； 2. 细胞在传代细胞中注意消散，不然难贴壁； 3. 成团生长，细胞密度越大，表面空泡黑点越多； 4. 一般细胞长至80%传代，细胞成片，其实密度很大； 5. 细胞生长太满对细胞状态影响严重，传代后易碎，死亡； 6. 细胞生长时间越久，消化难度也会随之增加；消化到轻拍培养瓶侧边细胞可以滑落的时候可以终止。

细胞培养步骤：

一、Caco-2 (人结直肠腺癌细胞)复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

三、细胞冻存：

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃

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