ER/PR免疫组化检测试剂盒 H

简要描述：ER/PR免疫组化检测试剂盒 H ,M,R,Rb 对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

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更新时间：2023-10-24 00:00:00
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ER/PR免疫组化检测试剂盒    H   做线粒体膜UCP2蛋白的Western Blot （以下简写成Western Blot），提取线粒体后冻存（未加蛋白酶抑制剂），样品不能反复冻融;，加蛋白酶抑制剂。同时，建议检查Western Blot过程，提高一抗浓度。对于加蛋白酶抑制剂来说，一般加PMSF就可以了，能多加几中种蛋白酶抑制剂。
同一蛋白样品能同时进行两种因子的Western Blot检测，有的甚至可以同时测几十种样品。
如果是膜蛋白和胞浆蛋白，所用的去垢剂就要温和得多，这时加上NaF去抑制磷#化酶的活性。
样品的蛋白含量很低，每微升不到微克，但是在转膜时经常会发现只有一部分蛋白转到了膜上，就是在转膜后染胶发现有的孔所有的蛋白条带都在，只是颜色变淡了，可以加大上样量，转移时可以用减少电流延长时间，多加5-0%甲醇。
ER/PR免疫组化检测试剂盒    H 想分离的蛋白是分子量260kd的，SDS-PAGE电泳的分离胶浓度用6%，Stacking Gel 3.5%，但260kd的蛋白不好做
如果上样量超载，可以浓缩样品，也可以根据你的目标分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地，超载30%是不会有问题的。如果已经超了不少了，而且小分子量的也要，可以考虑加大胶的厚度，可以试试.5mm的 comb。
蛋白变性后存放-80℃，一两年没有问题，zui关键两条：不要被蛋白酶水解掉;不要被细菌消化掉（也是被酶水解了）。
ER/PR免疫组化检测试剂盒    H 采用DAB显色技术，二抗是化的多克隆抗体，三抗是亲和素体系，不能使用脱脂奶粉，脱脂奶粉会影响亲和素的生成，因为脱脂奶粉中含，用BSA代替应该好一点.
Western Blot一般上样30-00微克不等，结果跟目的蛋白的丰度、上样量、一二抗的量和抚育时间都有关系，也与显色时间长短有关。开始摸条件时，为了拿到阳性结果，各个步骤都可以量多一点时间长一点，当然背景也就出来了。要拿到好的结果，如果抗体好的话比较容易，抗体不好的话就需要反复地试了，当然有的不适合Western Blot的怎样做也不行。所以拿到好的结果不容易。

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