人原钙黏素 ELISA试剂盒

简要描述：公司销售品牌有原装R&D，IBL，TSZ，主要用于科研方面，不用于临床诊断。可以用于检测各种指标，本公司提供人原钙黏素 ELISA试剂盒免费代测，询价或在线咨询！试剂盒优价现货！

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更新时间：2023-10-24 00:00:00
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人原钙黏素 ELISA试剂盒酶联免疫吸附测定试剂盒
使用说明书elisa法测定
规格：48T/96T
本试剂盒仅供体外研究使用!
ELISA法定量测定人尿液或其它相关生物液体中人原钙黏素 ELISA试剂盒的含量。

标本的采集及保存
. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 000 g离心5分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本的稀释原则：
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。zui后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至ml，盖好后静置0分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为50 U/L，做系列倍比稀释后，分别稀释50 U/L，25 U/L，2.5 U/L，6.25 U/L，3.2 U/L，.56 U/L，0.78 U/L，样品稀释液直接作为标准浓度0 U/L，临用前5分钟内配制。
如配制25 U/L标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）50 U/L的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
标记抗体的稀释原则：临用前以标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔00μl），实际配制时应多配制0.-0.2ml。如0μl标记抗体加990μl标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔00μl），实际配制时应多配制0.-0.2ml。如0μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液00μl，余孔分别加标准品或待测样品00μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应20分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加标记抗体工作液 00μl（取μl标记抗体加99μl标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡-2分钟，200μl/每孔，甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同标记抗体工作液） 00μl，37℃，60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡-2分钟，200μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔显色不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后5分钟以内进行检测。

反复冻融。

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