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H-4-II-E-C3 [H4-II-E-C3] (大鼠肝癌细胞)

简要描述：H-4-II-E-C3 [H4-II-E-C3] (大鼠肝癌细胞)生长培养基DMEM＋20%HS＋5%FBS＋1%P/S　冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO

产品型号：GOY-01X0340　
厂商性质：科研
更新时间：2023-09-15 15:46:27
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产品名称	规格	货号
H-4-II-E-C3 [H4-II-E-C3] (大鼠肝癌细胞)	1×10⁶/T25培养瓶	GOY-01X0340

商品详情：

名称；H-4-II-E-C3 [H4-II-E-C3] (大鼠肝癌细胞)

种属　大鼠

生长特性　贴壁细胞

细胞形态　上皮细胞样

生长培养基　DMEM＋20% HS＋5% FBS＋1% P/S

冻存条件　

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件　

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

推荐传代比例　1:3-1:4

推荐换液频率　2~3次/周

背景描述　H-4-Ⅱ-E-C3细胞在糖皮质激素、胰岛素或cAMP衍生物的诱导下可以产生酪氨酸氨基转移酶；可被逆转录病毒感染；H-4-Ⅱ-E-C3细胞可产生白蛋白、转铁蛋白、凝血酶原；H-4-Ⅱ-E-C3细胞在AxC大鼠中可以成瘤。

组织来源　肝；肝癌

细胞类型　肿瘤细胞

肿瘤类型　肝胆癌细胞

细胞培养步骤：

一、H-4-II-E-C3 [H4-II-E-C3] (大鼠肝癌细胞)复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

三、细胞冻存：

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃

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