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RT-PCR试剂盒

简要描述:RT-PCR试剂盒是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:
  • 更新时间:2022-11-16 00:00:00
  • 访  问  量:78

详细介绍

性能指标:
.试剂盒检测特异性为00%
2. 检测试剂盒重现性为00%
3. 灵敏度可达到03/ml
4. 有效期为6个月产品名称:RT-PCR试剂盒
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。

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使用方法:
一、样品 RNA 的制备
、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 0 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2%2B
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 5-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至0kb的片段。
③引物碱基:G%2BC含量以40-60%为宜,G%2BC太少扩增效果不佳,G%2BC过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.~umol或0~00pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
?啶-2.6-二羧二甲酯 5453-67-8 0次 SureClone RACE Kit -20℃保存

5-溴戊酯 5454-83- 0次 SureClone eTS Core Kit -20℃保存

2-硝苯胺 5455-59-4 0次  

N-(2,3-环氧丙基)邻苯二 5455-98- 0次  

N-乙基环己胺 5459-93-8 0次  

-羟乙基-4-基哌 5464-2-0 套  

甘油缩甲 5464-28-8 套  

2-氨基-4-甲氧苯并噻唑 5464-79-9 7次  

2-硝基亚氨基咪唑烷 5465-96-3 0次  

2-甲氧基-5-硝基-6-基啶 5467-69-6 0次  

2-氨基-4-溴苯乙酮 盐盐 5467-72- 套  

2-氨基-4'-溴苯乙酮 2098049 000U p9 siRNA Binding Protein -20℃保存

溴化亚酮 54678-23-8 50次 p9 miRNA Detection Kit -20℃保存

4-氯-2-啶甲 5470-22-4 00次 EMSA Kit -20℃保存

2-基-4-硝基啶-N-氧化物 5470-66-6 50fpu rhAP (c-Jun) 4℃保存
RT-PCR试剂盒生素Ⅷ号培养基  规格: 0.ml  Rat deoxypyridinoline,DPD  

标准平板计数琼脂培养基  规格: 0.ml  Rat advanced glycation end products,AGEs

平板计数琼脂  规格: 0.2ml  Rat omentin

动力-吲哚-尿素培养基基础  规格: 0.2ml  Rat Vitamin A,VA

醋铅培养基  规格: 0.2ml  Rat Vitamin B2,VB2

EF-8琼脂  规格: 0.2ml  Rat Vitamin B6,VB6

双岐杆菌生化基础培养基  规格: 0.ml  Rat Vitamin C,VC

营养琼脂斜面  规格: 0.ml  Rat Vitamin D,VD

月桂基盐胰蛋白胨肉汤  规格: 0.ml  Rat Vitamin D2,VD2

月桂基盐胰蛋白胨MUG培养基  规格: 0.ml  Rat Vitamin D3,VD3

EC肉汤  规格: 0.ml  Rat Vitamin E,VE

新生素增菌肉汤  规格: 0.ml  Rat Vitamin K,VK

mTSB肉汤  规格: 0.2ml  Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA99

SD-39琼脂  规格: 0.2ml  Rat Pepsin,PP

乳糖肉汤培养基  规格: ml  Rat Motilin,MTL
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 

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