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鸡卵泡基膜细胞

鸡卵泡基膜细胞

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产品概述 product description

细胞简介 鸡卵泡基膜细胞分离自鸡卵泡组织;成熟卵泡是卵巢的组织结构成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明显。卵泡内膜细胞紧靠卵泡颗粒层,与颗粒层细胞之间有一层基膜相隔,内膜细胞呈多边形,胞质清亮,胞核圆形,细胞间可见许多毛细血管,外膜细胞位于最外层,多呈梭形,与周围结缔组织分界不明显。卵泡(follicle)中卵母细胞四周有一层菱形或扁平细胞围绕,在卵泡开始发育、卵细胞成长的同时,周围的菱形细胞变为立方形,并由单层增生成复层,因其细胞浆内含有颗粒,故称为颗粒细胞。初级卵泡的颗粒细胞为单层;次级卵泡的颗粒细胞增至复层;成熟卵泡的颗粒细胞展开又变为单层。颗粒细胞的胞核大而圆,着色深,细胞的游离面有许多细长突起伸入放射带的凹陷部。

产品属性
产品名称 鸡卵泡基膜细胞
组织来源 鸡卵泡组织
默认种属 三黄鸡,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 鸡卵泡基膜细胞完全培养基(含FBS、EGF、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
鸡卵泡基膜细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
质量检测 实验室分离的鸡卵泡基膜细胞经3β-HSD免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
方法简介 实验室分离的鸡卵泡基膜细胞采用先机械分离后胶原酶反复消化法、并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:M199 培养基、10% 鸡胚血清、青霉素链霉素、0.1%Ⅰ 型胶原酶、PBS。
2. 器械:解剖剪、弯镊、培养皿、筛网,选取产蛋期母鸡卵泡组织。
3. 耗材灭菌,提前配制完全培养基置于 37℃预热。
二、取材与预处理
1. 活鸡处死后打开腹腔,摘取发育良好的各级卵泡,剥离卵泡外层结缔组织。
2. 沿卵泡膜小心剪开卵泡,去除卵黄与卵母细胞,保留卵泡基膜层,预冷 PBS 反复冲洗。
3. 将基膜组织剪切成细小碎片,PBS 漂洗 3 次去除卵黄残留。
三、细胞分离与消化
1. 组织碎片加入胶原酶消化液,37℃水浴消化 35min,间断吹打打散组织。
2. 培养基终止消化,筛网过滤得到单细胞悬液,离心收集细胞沉淀。
3. PBS 重悬离心洗涤一次,去除酶液杂质。
四、纯化与接种培养
1. 完全培养基重悬细胞接种培养瓶,常规 37℃5% CO₂培养。
2. 24h 换液清除未贴壁杂细胞,每 2~3 天更换培养基。
3. 细胞长满后胰酶消化传代,可通过差速贴壁去除卵泡上皮杂细胞。