人肺动脉成纤维细胞分离自肺大动脉组织；肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺动脉成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺动脉成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持肺动脉的正常形态；合成和释放细胞外基质；组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品属性 product attributes
产品名称 人肺动脉成纤维细胞
组织来源 肺大动脉组织
默认种属 人，其他咨询
培养基： 人肺动脉成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人肺动脉成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的人肺动脉成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人肺动脉成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来。
操作步骤 operation steps
取肺动脉外膜结缔组织，剔除血管平滑肌层与内皮，PBS 多次冲洗去除红细胞。
组织块贴壁法培养，无需酶消化，将 1mm³ 组织块均匀铺于培养瓶底，倒置干燥 30min。
缓慢加入低血清成纤维培养基，缓慢平放培养瓶，37℃静置 5 天不移动培养瓶。
第 5 天观察组织块周边爬出梭形成纤维细胞，首次全换液去除漂浮组织碎块。
持续培养至细胞向外铺展汇合 85%，使用胰酶消化收集原代肺动脉成纤维细胞。
传代后降低接种密度至 2×10⁵个 /mL，减缓细胞增殖速度延长细胞使用寿命。
细胞冻存前 24h 更换新鲜培养基，保证细胞活力，复苏后 24h 即可贴壁生长。
