人外周血白细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。白细胞(Leukocyte),旧称白血球,血液中的一类细胞。根据白细胞的细胞质内有无特殊颗粒,可将其分为有粒白细胞和无粒白细胞。前者常简称为粒细胞,根据其特殊颗粒的染色特性,又分为中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞,白细胞也通常被称为免疫细胞。在显微镜下可以看到,血细胞中体积比较大、数量比较少,具有细胞核;其主要作用是吞噬细菌、防御疾病。
产品属性 product attributes
产品名称 人外周血白细胞
简称 PBL;PWBC
组织来源 外周血
默认种属 人,其他咨询
培养基: 人外周血白细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 悬浮
细胞形态: 圆形
传代比例: 不传代
传代特性: 不增殖;不传代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人外周血白细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的人外周血白细胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人外周血白细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来。
操作步骤 operation steps
冻存管取出,37℃水浴快速复融,酒精消毒冻存管外壁,转入超净台。
细胞悬液转移离心管,淋巴细胞专用完全培养基缓慢稀释冻存液。
1000‑1200rpm 离心 5min,弃上清,保留细胞沉淀,悬浮细胞注意操作轻柔。
加入悬浮细胞完全培养基,轻柔吹打重悬细胞沉淀,不要求贴壁。
细胞计数,调整细胞密度,接种悬浮培养瓶。
37℃、5% CO₂培养箱静置悬浮培养。
24h 镜检细胞活力,半量更换新鲜培养基,依据细胞增殖进行分瓶扩增。
