人口腔上皮细胞分离自口腔黏膜组织;口腔上皮细胞是一种上皮细胞,呈扁平、多边形,形状不规则。口腔各壁都有黏膜覆盖,口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部。上皮的垂直切面上,细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状,为具有增殖分化能力的干细胞,部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞,再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状,基底层细胞能不断分裂增生,以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的毛细血管,有利于复层扁平上皮的营养。
产品属性 product attributes
产品名称 人口腔上皮细胞
组织来源 口腔黏膜组织
默认种属 人,其他咨询
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 人口腔上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人口腔上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的人口腔上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人口腔上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏:口腔上皮细胞适应性强,复苏常规快速操作。37℃水浴1min内解冻,消毒管壁后移入口腔上皮专用无血清培养基,1000rpm离心4min,重悬后接种,静置24h培养。
细胞换液:复苏24h首次换液,后续每48h换液一次。PBS清洗去除口腔源性杂质与死细胞,更换新鲜培养基,维持细胞角化前上皮形态。
细胞传代:细胞融合度85%传代,专用上皮消化液消化2min,脱壁终止消化,离心重悬,按1:5比例传代,保证细胞均匀增殖。
细胞消化:快速解离口腔上皮细胞连接,消化2min,轻柔吹打分散单细胞,避免细胞堆叠角化异常。
细胞冻存:冻存液配比85%无血清培养基+10%FBS+5%DMSO,细胞密度8×10⁵个/mL,常规梯度冻存,稳定保留细胞特性。
细胞接种:接种密度5×10³个/cm²,静置6h贴壁,单层平铺生长,形态规整。
细胞质控:细胞呈多边形鹅卵石形态、排列整齐、无角化异常、无杂菌污染,增殖稳定,适用于口腔黏膜损伤、炎症、口腔肿瘤前期机制研究。
