人脑静脉血管平滑肌细胞分离自脑静脉组织；与脑动脉相比，脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同，脑静脉管壁中没有静脉瓣，静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为：大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉；小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛，进入静脉导血管再到头皮，最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛，即使两侧颈内静脉都被阻塞，大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性 product attributes
产品名称 人脑静脉血管平滑肌细胞
组织来源 脑静脉组织
默认种属 人，其他咨询
培养基： 人脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人脑静脉血管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的人脑静脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人脑静脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：脑静脉平滑肌细胞增殖缓慢，温和低损复苏。37℃慢速解冻，消毒后移入专用培养基，1000rpm离心5min，重悬接种，静置30h。
细胞换液：复苏30h首次换液，后续每48h换液，维持平滑肌舒张收缩平衡。
细胞传代：细胞融合度92%传代，消化5min，按1:5比例传代，严控传代次数。
细胞消化：温和松弛消化，防止细胞挛缩坏死，轻柔分散细胞。
细胞冻存：冻存液88%培养基+10%FBS+2%DMSO，低毒保护细胞功能，细胞密度7×10⁵个/mL。
细胞接种：接种密度7×10³个/cm²，静置7h贴壁，均匀舒展生长。
细胞质控：细胞梭形均匀、舒张功能稳定、无异常增殖，无菌无污染，适用于脑静脉血管重塑、血流动力学研究。
