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人肺大动脉内皮细胞

人肺大动脉内皮细胞

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产品概述 product description

细胞简介 人肺大动脉内皮细胞分离自肺大动脉组织;肺大动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中,把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室,在主动脉之前向左上后方斜行,在主动脉弓下方分为左、右肺动脉,经肺门入肺。肺动脉干位于心包内,为一粗短的动脉干。起自右心室,在升主动脉前方向左后上方斜行,至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短,在左主支气管前方横行,分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗,经升主动脉和上腔静脉后方向右横行,至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。细胞呈单层多角形铺路石状分布;该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。肺大动脉内皮细胞呈单层多角形铺路石状分布,该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。

产品属性
产品名称 人肺大动脉内皮细胞
组织来源 肺大动脉组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 人肺大动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人肺大动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
质量检测 实验室分离的人肺大动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
方法简介 实验室分离的人肺大动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:EGM-2 内皮专用培养基、肝素、Ⅰ 型胶原酶、无菌 PBS、75% 酒精。
2. 耗材:血管夹持器械、结扎线、离心管、培养瓶;人肺大动脉取自合法手术废弃标本。
3. 标本低温转运,全程无菌无热源操作。
二、取材与预处理
1. 取肺大动脉血管,剔除血管外膜脂肪纤维组织,肝素 PBS 冲净管腔内血液。
2. 血管两端结扎一端,PBS 灌入管腔反复冲洗内腔 3 次,排空液体。
3. 酒精擦拭血管外壁,严禁消毒液进入血管内部损伤内皮。
三、细胞分离与消化
1. 管腔内灌满 0.1%Ⅰ 型胶原酶,封口结扎,37℃水浴消化 20min。
2. 收集腔内消化液,培养基冲洗血管内壁,合并所有细胞悬液。
3. 1000rpm 离心 6min,弃上清,PBS 洗涤细胞沉淀。
四、纯化与接种培养
1. EGM-2 完全培养基重悬细胞,接种培养瓶静置贴壁。
2. 16h 首次换液,去除悬浮死细胞与杂细胞,后续隔日换液。
3. 细胞融合后 1:2 传代,vWF、CD31 鉴定内皮细胞,人原代细胞建议 P1-P2 代使用。