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人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒

简要描述:售后:我公司具有优质的技术团队,人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒一旦售出,产品仅用于科研实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。

  • 产品型号:GOY-0176E
  • 厂商性质:
  • 更新时间:2022-11-25 12:59:15
  • 访  问  量:25

详细介绍

产品属性:

产品名称

英文名称

规格

货号

人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒

Human Endocrine  gland vascular endothelial growth factor, EG-VEGF Elisa Kit

48T/96T

GOY-0176E

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)水平。用纯化的人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF),再与HRP标记的人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)浓度。 

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(80pg/ml

0.5ml×1

3

标包被

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2  

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

试剂配制:

1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。

2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6、标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100

7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

1.jpg

操作步骤

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

40pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

20pg/ml

4号标准品

150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

10pg/ml

3号标准品

150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

5pg/ml

2号标准品

150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

2.5pg/ml

1号标准品

150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。   

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

7.温育:操作同3

8.洗涤:操作同5

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色10分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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