兔主动脉内皮细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞,可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态,当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管疾病的发生。因此,主动脉内皮细胞已成为研究心血管疾病发病机制及治疗药物不可缺少的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞,由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至最小的微血管。
产品属性 product attributes
产品名称 兔主动脉内皮细胞
组织来源 主动脉组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 兔主动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔主动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的兔主动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的兔主动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 细胞复苏:取出冻存兔主动脉内皮细胞冻存管,37℃水浴快速融化冻存样本,少量冰晶残留取出冻存管,75% 酒精擦拭管壁,移入生物安全柜,细胞悬液缓慢滴加到含有内皮细胞完全培养基的离心管。
2. 离心去除冻存保护剂:离心管配平,1000rpm 离心 5min,离心完成,轻柔吸弃上层冻存上清液,内皮细胞沉淀松散,切勿吸走细胞。
3. 温和重悬细胞沉淀:加入预热兔主动脉内皮细胞完全培养基,轻柔吹打管底沉淀,打散细胞团聚物,制备单细胞悬液,规避剧烈吹打造成细胞破损。
4. 计数接种铺瓶:活细胞计数,按照大血管内皮细胞推荐密度接种培养瓶,接种结束十字晃动培养瓶,细胞均匀分布瓶底。
5. 培养箱静置孵育贴壁:将培养瓶放入 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱,静置孵育 24h,不随意挪动培养瓶,保障内皮细胞贴壁伸展。
6. 首次换液清除死细胞碎片:孵育 24h 后镜检细胞贴壁情况,弃旧培养基,去除悬浮死亡细胞,添加预热新鲜完全培养基放回培养箱。
7. 扩增培养传代应用:每 2‑3 天更换培养基,观察内皮细胞鹅卵石样形态,汇合 80‑85% 胰酶消化传代,用于血管内皮损伤、动脉相关体外实验。
