兔子宫内膜上皮细胞分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫内膜即黏膜，由上皮（属单层柱状上皮，有分泌细胞和纤毛细胞二种）和固有膜（由结缔组织构成，其内有大量的星形细胞，称为基质细胞）组成，子宫内膜可分为浅表的功能膜和深部的基底层，功能层较厚，约占内膜厚度的4/5；基底层较薄较致密，约占1/5，功能层可剥脱，而基底层不可剥脱。子宫内膜上皮细胞主要功能：①子宫内膜亦称子宫黏膜，是指构成哺乳类子宫内壁的一层；②子宫内膜对动情素和孕激素都起反应，因此可随着性周期（发情周期、月经周期）发生显著的变化。子宫内膜与胚胎附植密切相关，在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎与母体“对话”的过程中，子宫内膜上皮细胞充当了极其重要的角色。子宫内膜构成雌性哺乳动物子宫壁的最内层，位于子宫腔面，在动物生殖生理活动中占有重要地位。子宫和子宫内膜是维持雌性动物生理功能和生育能力的重要器官，子宫内膜的再生修复是子宫的重要生理功能。体外培养的子宫内膜上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
产品属性 product attributes
产品名称 兔子宫内膜上皮细胞
组织来源 子宫组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 兔子宫内膜上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔子宫内膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的兔子宫内膜上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的兔子宫内膜上皮细胞采用胶原酶消化法，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
步骤一：前期无菌预处理 提前30分钟开启超净台紫外消毒，消杀所有实验耗材与操作区域，检查培养箱CO₂浓度、温度、湿度参数是否稳定。操作人员穿戴无菌防护装备，酒精消毒手部与操作台面。将子宫内膜上皮细胞专用培养基、无菌PBS、温和消化液预热备用，该细胞对培养环境敏感度极高，需提前排查所有试剂无杂质、无污染，保证实验条件最优。
步骤二：细胞恒温解冻复苏 取出冻存细胞，放入37℃水浴快速晃动解冻，冰晶基本融化后立即取出，减少细胞暴露室温的时间。消毒冻存管外壁，无菌吸取细胞悬液，转移至含5mL预热完全培养基的离心管中，轻柔吹打混匀，稀释冻存保护剂，降低毒性损伤，保护子宫内膜上皮细胞的活性与完整性。
步骤三：低速离心净化杂质 设置离心机参数为室温220g、6分钟，低速离心避免娇嫩上皮细胞破损。离心完成后，缓慢吸弃上层废液，保留管底完整细胞沉淀，加入3mL预热无菌PBS缓冲液，温和重悬细胞，再次离心清洗，彻底去除残留冻存液、死细胞碎片与杂质，提升细胞培养纯度。
步骤四：适宜密度接种 吸净PBS废液，加入专用完全培养基，轻柔吹打制成均匀单细胞悬液，计数后调整细胞密度至9×10⁴个/mL，接种至无菌培养瓶中。轻轻十字摇晃培养瓶，使细胞均匀分布，子宫内膜上皮细胞依赖均匀的生长环境维持极性形态，避免局部密度不均导致生长异常。
步骤五：恒温静置培育 将培养瓶平稳放入37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱，静置培养36小时，全程保持培养环境绝对稳定，禁止随意开启、挪动培养瓶。该细胞贴壁周期长，缓慢贴壁伸展过程中需杜绝环境扰动，保障细胞顺利附着、生长。
步骤六：阶段性换液维护 培养36小时后完成首次换液，轻柔移除旧培养基，补充新鲜预热完全培养基，去除悬浮死细胞与代谢废物。后续每72小时换液一次，严格遵循慢换液、轻操作原则，避免机械冲击损伤贴壁细胞，持续维持培养基营养平衡与无菌状态。
步骤七：可控传代培养 当细胞融合度达到80%时进行传代操作，PBS轻柔清洗细胞表面，加入低浓度胰酶消化液恒温消化4-5分钟，显微镜观察细胞形态变化，细胞回缩变圆后即刻终止消化。温和吹打收集细胞悬液，低速离心重悬，按1:2比例传代扩增，全程严控消化时间，防止消化过度导致细胞损伤、凋亡，定期观察细胞上皮典型形态。
