兔子宫平滑肌细胞分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫肌层比较厚，由成束或成片的平滑肌组成，肌束间以结缔组织分隔。子宫平滑肌具有收缩功能，收缩受激素的调节，其收缩活动有助于精子向输卵管运送、经血排出以及胎儿娩出。子宫平滑肌层含有大量的血管，如果平滑肌层细胞过度生长，势必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，体外培养平滑肌细胞有利于研究子宫和其他富含血管器官的血管形成机制。子宫平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。子宫平滑肌细胞的主要功能：①子宫平滑肌能保持子宫的基本形态，在孕期能最大化的扩张子宫容积，保证胎儿孕育环境；②平滑肌细胞有收缩舒张能力，在生产时能形成生理性的缩腹环，推动胎儿向下移动，辅助生产。
产品属性 product attributes
产品名称 兔子宫平滑肌细胞
简称 USMCs
组织来源 子宫组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
培养基： 兔子宫平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔子宫平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的兔子宫平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的兔子宫平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来。
操作步骤 operation steps
步骤一：标准化无菌准备 提前30分钟对超净工作台、实验耗材、试剂进行全面紫外消毒灭菌，校准细胞培养箱温度、CO₂浓度、湿度参数。操作人员完成无菌防护与手部消毒，将子宫平滑肌细胞专用培养基、PBS缓冲液、胰蛋白酶消化液预热至37℃，平滑肌细胞增殖稳定，需保证培养环境无菌、试剂适配，为细胞生长提供基础条件。
步骤二：快速解冻复苏细胞 取出液氮冻存的子宫平滑肌细胞，37℃水浴快速晃动解冻，1分钟内完成解冻，留存微量冰晶即可取出。酒精消毒冻存管外壁后，无菌转移细胞悬液至含预热完全培养基的离心管中，轻柔混匀，稀释冻存保护剂，降低化学毒性对平滑肌细胞的损伤。
步骤三：离心清洗纯化 室温250g离心5分钟，使活细胞充分沉降，分离上清中的杂质与死细胞。离心后吸弃废液，加入预热PBS缓冲液重悬细胞，再次同等参数离心清洗，彻底清除残留冻存液与代谢废弃物，保证细胞沉淀纯净，无杂质干扰后续培养。
步骤四：定量接种铺板 吸弃PBS液体，加入适量平滑肌细胞专用完全培养基，轻柔吹打制备均匀单细胞悬液，计数后调整细胞密度至1.1×10⁵个/mL，接种于无菌培养瓶中。轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布，利于平滑肌细胞均匀贴壁、舒展生长。
步骤五：恒温稳定培养 将接种后的培养瓶置于37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱静置培养24小时，期间保持培养环境稳定，不扰动培养瓶。子宫平滑肌细胞贴壁速度适中，稳定的恒温恒湿环境可有效促进细胞贴壁、伸展，维持梭形典型细胞形态。
步骤六：常规换液养护 培养24小时后观察细胞贴壁情况，完成首次换液，吸除陈旧培养基与悬浮死细胞，更换新鲜预热完全培养基。后续每48小时换液一次，及时补充营养、清除代谢废物，维持培养基理化性质稳定，保障平滑肌细胞持续增殖生长。
步骤七：规律传代扩增 细胞融合度达85%时进行传代，PBS清洗细胞2次，加入胰蛋白酶消化液消化3分钟，显微镜下观察细胞回缩、梭形形态消失后，立即加培养基终止消化。吹打收集细胞悬液，离心重悬后按1:3比例分瓶传代，持续扩增培养，每日观察细胞形态，及时排查污染与生长异常问题。
