腹腔主动脉内皮细胞覆盖于腹腔主动脉内壁,构成腹腔主动脉的血管屏障。这类细胞通过分泌NO等血管活性物质调节血管张力,维持腹腔器官供血,在腹主动脉瘤、动脉粥样硬化和血管再狭窄研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 腹腔主动脉内皮细胞
组织来源:人/大鼠正常腹腔主动脉组织
细胞形态:多角形或短梭形,呈铺路石状排列
生长特性:贴壁生长,接触抑制明显
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:内皮细胞专用培养基,添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分钟
包被条件:推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的腹腔主动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的腹腔主动脉内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 分离腹腔主动脉,预冷 PBS 冲洗血管外壁;结扎血管远端一端。
2. 预温 0.1% 胶原酶溶液灌注血管内腔,封闭另一端;37℃水浴孵育 15‑20min。
3. 轻轻摇晃血管,洗脱血管内壁内皮细胞,收集腔内酶‑细胞悬液。
4. 内皮完全培养基注入血管冲洗,合并所有洗脱液;300g 离心 5min。
5. 弃上清,内皮细胞完全培养基重悬沉淀。
6. 明胶包被培养瓶接种细胞,37℃ 5% CO₂孵箱培养,24h 首次换液。
7. CD31、vWF 免疫荧光鉴定内皮细胞纯度。
