颈动脉成纤维细胞位于颈动脉外膜层,是颈动脉外膜的主要细胞类型。这类细胞通过合成细胞外基质和分泌炎症因子参与颈动脉血管重塑,在颈动脉粥样硬化、血管再狭窄和血管炎症研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 颈动脉成纤维细胞
组织来源:人/大鼠正常颈动脉组织
细胞形态:长梭形或不规则三角形,呈成纤维细胞样
生长特性:贴壁生长,密度低时呈放射状排列,高密度时呈漩涡状
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:DMEM/F12培养基,添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:3至1:5比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的颈动脉成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的颈动脉成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 颈动脉血管样本预冷 PBS 冲洗干净外壁血迹。
2. 显微解剖剥离血管最外层外膜结缔组织,舍弃血管中膜与内膜组织。
3. 外膜结缔组织剪碎成细小组织块。
4. I 型胶原酶 37℃摇床消化 60 min。
5. 完全培养基终止消化,70μm 筛过滤悬液,250g 离心 5 min 弃上清。
6. 成纤维细胞完全培养基重悬沉淀,接种培养瓶孵箱培养。
7. 48 h 首次换液,每 2‑3 天换液;Vimentin 鉴定成纤维细胞。
