股动脉平滑肌细胞位于股动脉中膜层,通过收缩和舒张调节下肢血管张力维持下肢供血。这类细胞在下肢动脉硬化闭塞症中发生异常增殖和表型转化导致血管狭窄,是研究下肢血管疾病的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 股动脉平滑肌细胞
组织来源:人/大鼠正常股动脉组织
细胞形态:长梭形或不规则形,呈成纤维细胞样外观
生长特性:贴壁生长,低密度时交织成网状,高密度时呈旋涡状或栅栏状排列
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:平滑肌细胞专用培养基,添加FBS、胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子(EGF)等生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:4比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
体外寿命:可传代培养5-8代,建议在P3-P5代进行实验
质量检测 quality test
实验室分离的股动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的股动脉平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过平滑肌细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 取出股动脉血管,PBS 清洗;显微剥离血管外膜全部结缔组织。
2. 纵向剪开血管,无菌棉签擦拭血管内壁,去除内皮细胞,保留血管中膜。
3. 将乳白色血管中膜剪碎至细小碎块。
4. II 型胶原酶 37℃摇床消化 90 min。
5. 培养基终止消化,70μm 筛过滤;250g 离心 5 min 弃上清。
6. 血管平滑肌完全培养基重悬沉淀,接种培养瓶孵箱培养。
7. 2‑3 天换液,α‑SMA 染色鉴定平滑肌细胞。
