颈静脉内皮细胞覆盖于颈静脉内壁，构成颈静脉血管屏障。这类细胞调节颈静脉通透性和张力，参与脑部静脉回流和静脉血栓形成，在静脉血栓、静脉曲张和脑静脉回流障碍研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 颈静脉内皮细胞
组织来源：人/大鼠正常颈静脉组织
细胞形态：多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的颈静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的颈静脉内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 无菌解剖分离颈静脉血管，预冷 PBS 冲洗血管外壁。
2. 结扎静脉远端管口，胶原酶溶液灌注血管内腔，封闭近端。
3. 37℃水浴孵育 15‑20min，轻柔拍打管壁洗脱内皮细胞。
4. 收集腔内细胞悬液，内皮培养基冲洗血管内腔，合并全部液体。
5. 300g 离心 5 min，弃上清，内皮完全培养基重悬沉淀。
6. 明胶包被培养瓶接种细胞悬液，37℃、5% CO₂孵箱培养。
7. 24h 首次换液，CD31/vWF 荧光染色鉴定内皮细胞。
