心肌干细胞是存在于心脏中的成体干细胞,具有自我更新和分化为心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞的能力。这类细胞在心肌损伤后参与心脏修复和再生,是心肌梗死、心力衰竭和心脏再生医学研究的重要种子细胞。
产品属性 product attributes
产品名称: 心肌干细胞
组织来源:人心脏组织
细胞形态:圆形或短梭形,体积较小
生长特性:贴壁生长,密度低时呈散在分布
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:心肌干细胞专用培养基,添加FBS、bFGF、EGF、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
包被条件:推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的心肌干细胞经c-Kit免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的心肌干细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过心肌干细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 无菌取心室心肌组织,预冷 PBS 反复冲洗去除残留血液。
2. 剔除心内膜、大血管,心肌组织剪碎至 1mm³ 组织块。
3. 复合消化液(胶原酶 II + 胰酶)分步多次 37℃消化心肌组织,分次收集细胞悬液。
4. 心肌干细胞完全培养基终止消化,70μm 滤网过滤悬液,离心收集沉淀。
5. 差速贴壁去除心肌成纤维细胞;c‑kit 免疫磁珠分选心肌干细胞。
6. 心肌干细胞专用扩增培养基重悬,纤连蛋白包被板接种培养。
7. 2‑3 天换液;c‑kit、Sca‑1 标志物鉴定心肌干细胞表型。
