主动脉弓内皮细胞覆盖于主动脉弓内壁,承受最大血流剪切力。这类细胞通过分泌NO等血管活性物质调节主动脉弓张力,维持血管稳态,在主动脉夹层、主动脉瘤和动脉粥样硬化研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 主动脉弓内皮细胞
组织来源:人/大鼠正常主动脉弓组织
细胞形态:多角形或短梭形,呈铺路石状排列
生长特性:贴壁生长,接触抑制明显
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:内皮细胞专用培养基,添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分钟
包被条件:推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的主动脉弓内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的主动脉弓内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 无菌取出主动脉弓血管,预冷 PBS 冲洗外壁。
2. 结扎血管远端,胶原酶溶液灌注血管内腔,封闭近端管口。
3. 37℃水浴孵育 15‑20 min,轻柔揉搓管壁洗脱内皮细胞。
4. 收集血管腔内洗脱液,内皮培养基冲洗血管内腔,合并悬液。
5. 300g 离心 5 min,弃上清,内皮完全培养基重悬沉淀。
6. 明胶包被培养瓶接种细胞,放入 5% CO₂孵箱培养。
7. 24 h 首次换液;CD31、vWF 鉴定内皮细胞。
