肝癌成纤维Liver-C-01细胞是从肝癌组织中分离的肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)，是肿瘤微环境的核心基质细胞。这类细胞通过分泌细胞因子和细胞外基质促进肿瘤增殖、侵袭和耐药，是研究肝癌微环境和靶向治疗的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 肝癌成纤维Liver-C-01细胞
组织来源：人肝癌组织
细胞形态：长梭形或不规则三角形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列，高密度时呈漩涡状
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：DMEM高糖培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:4比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的肝癌成纤维Liver-C-01细胞经α-SMA/FAP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的肝癌成纤维Liver-C-01细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过肿瘤相关成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:37℃水浴快速融化冻存管 (1‑2 min)，75% 酒精擦拭管壁，无菌转移至含完全培养基离心管，1000 rpm 离心 5 min，弃上清。
重悬接种:加入 2‑3 mL 肝癌成纤维专用完全培养基轻柔吹打重悬细胞沉淀，接种于 T25 培养瓶，放入 37℃、5% CO₂恒温培养箱。
首次换液:复苏后 24 h 观察贴壁状态，弃旧培养基，PBS 清洗 1 次，更换新鲜完全培养基，去除未贴壁死细胞。
日常换液:每 2‑3 天更换一次完全培养基，镜下观察细胞形态、有无污染、成纤维梭形状态。
传代消化:细胞汇合度达 80‑85%；弃培养基，PBS 洗 2 次；加入 0.25% 胰酶‑EDTA，室温消化 2‑3 min；镜下见细胞回缩变圆立刻加等量完全培养基终止消化。
离心分瓶:吹打瓶壁收集细胞悬液，1000 rpm 离心 5 min，弃上清，重悬后按 1:2~1:3 比例分瓶传代培养。
冻存 / 质控:汇合度 75‑80% 细胞消化收集，冻存液 (90% FBS+10% DMSO) 重悬，梯度降温后‑196℃液氮保存；定期做形态观察、支原体检测。
