肺动脉平滑肌细胞位于肺动脉中膜层，通过收缩和舒张调节肺血管阻力。这类细胞在肺动脉高压中发生异常增殖和表型转化，导致肺血管重塑和管腔狭窄，是研究肺动脉高压发病机制和靶向治疗的核心模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 肺动脉平滑肌细胞
组织来源：人/大鼠正常肺动脉组织
细胞形态：长梭形或不规则形，呈成纤维细胞样外观
生长特性：贴壁生长，低密度时交织成网状，高密度时呈旋涡状或栅栏状排列
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：平滑肌细胞专用培养基，添加FBS、胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子(EGF)等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:4比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
体外寿命：可传代培养5-8代，建议在P3-P5代进行实验
质量检测 quality test
实验室分离的肺动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的肺动脉平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过平滑肌细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存管 37℃水浴融化，酒精消毒管壁，移入离心管，平滑肌完全培养基混匀。
离心沉淀:1000 rpm 离心 5 min，弃上清废液。
接种培养:培养基重悬细胞沉淀，接种普通 T25 培养瓶，无需包被；37℃ 5% CO₂孵育。
换液流程:复苏 24 h 首次换液；之后每 2‑3 天换新鲜培养基。
消化传代:汇合度 85‑90%；弃培养基，PBS 清洗；胰酶消化 2‑3 min；完全培养基终止消化。
分瓶传代:吹打收集悬液，离心，重悬；传代比例 1:2~1:3。
冻存鉴定:冻存；α‑SMA 平滑肌标志物鉴定，支原体检测。
