主动脉瓣膜间质细胞是主动脉瓣膜的主要细胞类型，兼具成纤维细胞和平滑肌细胞特征。这类细胞合成细胞外基质维持瓣膜结构，在钙化性主动脉瓣膜病中发生成骨样分化，导致瓣膜钙化和狭窄，是研究瓣膜疾病的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 主动脉瓣膜间质细胞
组织来源：人/猪正常主动脉瓣膜组织
细胞形态：长梭形或不规则形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:4比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的主动脉瓣膜间质细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的主动脉瓣膜间质细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过间质细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存管 37℃水浴速融，酒精消毒外壁，转入离心管加入瓣膜间质细胞完全培养基。
离心:1000 rpm 离心 5 min，弃上清。
接种:重悬细胞沉淀，接种 T25 培养瓶，37℃，5% CO₂培养箱孵育。
换液:复苏后 24 h 换液，后续每 2‑3 天更换培养基。
消化:汇合度 80%；PBS 清洗；胰酶消化 2‑3 min；血清培养基终止。
传代分瓶:收集细胞悬液离心，重悬；1:2~1:3 传代。
冻存质控:冻存；定期检测间质细胞表型，支原体筛查。
