颈动脉内皮细胞覆盖于颈动脉内壁,是脑供血血管的重要屏障。这类细胞调节颈动脉张力维持脑血流,在颈动脉粥样硬化斑块形成中发挥关键作用,是研究脑卒中、动脉粥样硬化和血管再狭窄的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 颈动脉内皮细胞
组织来源:人/大鼠正常颈动脉组织
细胞形态:多角形或短梭形,呈铺路石状排列
生长特性:贴壁生长,接触抑制明显
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:内皮细胞专用培养基,添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分钟
包被条件:推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的颈动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的颈动脉内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:37℃水浴快速解冻冻存细胞,酒精消毒管壁,转入离心管加入颈动脉内皮完全培养基。
离心:1000 rpm 离心 5 min,弃上清废液。
包被接种:内皮培养基重悬沉淀,接种明胶包被培养瓶,CO₂培养箱孵育。
换液:复苏 24 h 换液;后续每 2 天更换新鲜培养基。
消化:汇合度 75‑80%;PBS 清洗;胰酶短时间消化 1‑2 min,培养基终止。
传代:离心收集细胞,重悬,1:2 分瓶传代。
冻存鉴定:冻存;CD31、vWF 内皮标志物检测,支原体质控。
