颈动脉平滑肌细胞位于颈动脉中膜层,通过收缩和舒张调节颈动脉张力维持脑供血。这类细胞在颈动脉粥样硬化中发生表型转化和异常增殖,导致血管壁增厚和管腔狭窄,是研究脑供血不足和动脉粥样硬化的核心模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 颈动脉平滑肌细胞
组织来源:人/大鼠正常颈动脉组织
细胞形态:长梭形或不规则形,呈成纤维细胞样外观
生长特性:贴壁生长,低密度时交织成网状,高密度时呈旋涡状或栅栏状排列
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:平滑肌细胞专用培养基,添加FBS、胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子(EGF)等生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:4比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
体外寿命:可传代培养5-8代,建议在P3-P5代进行实验
质量检测 quality test
实验室分离的颈动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的颈动脉平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过平滑肌细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存管 37℃水浴融化,酒精消毒外壁,移入离心管,平滑肌完全培养基混匀。
离心沉淀:1000 rpm 离心 5 min,弃上清。
接种培养:培养基重悬细胞,接种普通 T25 瓶,37℃、5% CO₂孵育。
换液维护:复苏后 24 h 换液,每 2‑3 天更换培养基。
消化传代:汇合度 85‑90%;PBS 清洗;胰酶消化 2‑3 min,培养基终止消化。
分瓶:离心收集细胞悬液,重悬;1:2‑1:3 传代。
冻存鉴定:冻存;α‑SMA 平滑肌标志物鉴定、支原体检测。
