肺动脉内皮细胞覆盖于肺动脉内壁，构成肺循环血管屏障。这类细胞通过分泌NO等血管活性物质调节肺血管张力，维持肺循环稳态，在肺动脉高压、肺栓塞和肺血管重塑等疾病中发挥关键作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 肺动脉内皮细胞
组织来源：人/大鼠正常肺动脉组织
细胞形态：多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的肺动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的肺动脉内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:37℃水浴快速解冻细胞冻存管，酒精擦拭外壁，转入离心管添加肺动脉内皮完全培养基。
离心收集:1000 rpm 离心 5 min，弃上清。
包被接种:内皮培养基重悬沉淀，接种明胶包被培养瓶，放入恒温 CO₂培养箱。
换液维护:复苏后 24 h 换液；之后每 2 天更换培养基。
消化传代:汇合度 80%；弃培养基，PBS 清洗；胰酶短时间消化 1‑2 min，培养基终止消化。
分瓶培养:离心收集细胞，重悬，1:2 比例传代。
冻存质控:冻存保存；CD31、VE‑cadherin 内皮标志物鉴定；微生物污染检测。
