胃黏膜上皮细胞覆盖于胃腔表面,构成胃黏膜屏障的第一道防线。这类细胞分泌黏液和碳酸氢盐形成保护层,抵御胃酸和胃蛋白酶侵蚀,在胃溃疡、胃炎和胃癌研究中发挥关键作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 胃粘膜上皮细胞
组织来源:人/小鼠/大鼠正常胃组织
细胞形态:上皮细胞样,柱状或多角形,呈铺路石状排列
生长特性:贴壁生长,需依赖细胞外基质支撑
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:上皮细胞专用培养基,添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素、转铁蛋白等生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分钟
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的胃粘膜上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的胃粘膜上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存细胞 37℃水浴快速融化,酒精消毒管壁,转入离心管,胃上皮专用完全培养基。
低速离心:800 rpm 离心 5 min,弃上清(低转速保护上皮)。
包被接种:培养基重悬细胞沉淀,接种多聚‑L‑赖氨酸包被培养瓶。
换液:复苏 24 h 轻柔换液;后续每 2 天换新鲜培养基,吹打动作轻柔。
温和消化:汇合度 70‑75%;PBS 轻洗;低浓度胰酶消化 1‑2 min,镜下即时终止。
传代:低速离心收集细胞,重悬,1:2 传代,原代≤3 代。
冻存鉴定:冻存;CK 上皮标志物检测、支原体筛查。
