结肠黏膜上皮细胞覆盖于结肠腔面，构成结肠黏膜屏障。这类细胞参与水分和电解质吸收、黏液分泌和肠道免疫防御，在结肠癌、溃疡性结肠炎和肠道菌群互作研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 结肠粘膜上皮细胞
组织来源：人/小鼠/大鼠正常结肠组织
细胞形态：上皮细胞样，柱状或多角形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素、转铁蛋白等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的结肠粘膜上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的结肠粘膜上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存细胞 37℃水浴快速解冻，酒精消毒管壁，转入离心管，结肠上皮专用培养基。
低速离心:800 rpm 离心 5 min，弃上清废液。
包被接种:培养基重悬细胞沉淀，接种多聚赖氨酸包被培养瓶。
换液:复苏后 24 h 轻柔换液；每 2 天更换新鲜培养基，严禁剧烈吹打。
温和消化:汇合度 70‑75%；PBS 轻洗；短时间胰酶消化 1‑2 min 立刻终止。
传代:低速离心收集细胞，重悬；1:2 传代；原代上皮控制传代次数≤3 代。
冻存鉴定:冻存；CK‑18 上皮标志物鉴定，支原体筛查。
