结肠成纤维细胞是结肠黏膜下层的主要间质细胞，为结肠上皮细胞提供结构支持。这类细胞通过分泌细胞外基质和细胞因子参与结肠组织修复和纤维化，在炎症性肠病、结肠癌微环境和肠道纤维化研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 结肠成纤维细胞
组织来源：人/小鼠/大鼠正常结肠组织
细胞形态：长梭形或不规则三角形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列，高密度时呈漩涡状
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:3至1:5比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的结肠成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的结肠成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存管 37℃水浴速融，酒精消毒外壁，离心管加入结肠成纤维完全培养基。
离心沉淀:1000 rpm 离心 5 min，弃上清废液。
接种培养:重悬沉淀接种普通 T25 瓶，37℃ 5% CO₂孵育。
换液:复苏后 24 h 换液，之后 2‑3 天换一次培养基。
消化:汇合度 80‑85%；PBS 清洗；胰酶消化 2‑3 min，完全培养基终止消化。
传代:离心收集细胞悬液，重悬，1:2‑1:3 分瓶传代。
冻存质控:冻存；Vimentin 鉴定，支原体检测。
