胆囊上皮细胞覆盖于胆囊黏膜表面,构成胆囊黏膜屏障。这类细胞通过吸收水分浓缩胆汁、分泌黏液保护胆囊壁,在胆囊炎、胆结石和胆囊癌研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 胆囊上皮细胞
组织来源:人正常胆囊组织
细胞形态:上皮细胞样,柱状或多角形,呈铺路石状排列
生长特性:贴壁生长,需依赖细胞外基质支撑
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:上皮细胞专用培养基,添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素等生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分钟
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的胆囊上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的胆囊上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存细胞 37℃水浴速融,酒精消毒管壁,转入离心管,胆囊上皮专用培养基。
低速离心:800 rpm 离心 5 min,弃上清废液。
包被接种:重悬沉淀接种多聚‑L‑赖氨酸包被培养瓶,CO₂孵育。
换液:复苏后 24 h 轻柔换液,每 2 天换新鲜培养基。
温和消化:汇合度 70‑75%;PBS 轻洗;胰酶消化 1‑2 min 立刻终止。
传代:低速离心收集细胞,重悬,1:2 传代,控制传代次数。
冻存质控:冻存;CK 上皮标志物检测、支原体筛查。
