成表皮角质形成细胞是表皮的主要细胞类型,占表皮细胞总数的90%以上。这类细胞通过增殖分化形成角质层构成皮肤屏障,抵御外界物理、化学和生物因子侵袭,在皮肤创伤修复、银屑病和皮肤肿瘤研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 成表皮角质形成细胞
组织来源:人正常皮肤表皮组织
细胞形态:多角形或扁平形,呈铺路石状排列
生长特性:贴壁生长,需依赖细胞外基质支撑
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:角质形成细胞专用培养基,添加KGM-Gold或K-SFM培养基及配套生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.05%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液,37℃消化3-5分钟
包被条件:推荐使用胶原蛋白Ⅳ包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的成表皮角质形成细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的成表皮角质形成细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过角质形成细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存管 37℃水浴快速解冻,酒精消毒外壁,离心管加入角质形成细胞专用无血清培养基。
离心沉淀:1000 rpm 离心 5 min,弃上清废液。
包被接种:培养基重悬细胞沉淀,接种多聚赖氨酸包被 T25 培养瓶。
换液维护:复苏 24 h 换液;之后每 2 天更换无血清角质培养基。
消化传代:汇合度 75‑80%;弃培养基,PBS 清洗;专用胰酶消化,1‑2 min 终止。
分瓶传代:离心收集细胞悬液,重悬,1:2 传代。
冻存鉴定:冻存;CK14 角质细胞标志物鉴定,支原体检测。
