iPSC分化的神经干细胞是由人iPSC经定向分化获得的多能神经前体细胞,具有自我更新和分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力。这类细胞是研究神经发育、神经退行性疾病模型和药物筛选的重要工具。
产品属性 product attributes
产品名称: iPSC分化的神经干细胞
组织来源:人iPSC分化来源
细胞形态:球形(神经球)或放射状排列的上皮样细胞
生长特性:可悬浮形成神经球,也可贴壁生长
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:神经干细胞专用培养基,添加B27、N2、bFGF、EGF等生长因子
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:神经球按1:2至1:3比例机械分离传代
消化液:Accutase解离液,37℃处理5-10分钟
包被条件:推荐使用多聚赖氨酸或Matrigel包被培养皿
质量检测 quality test
实验室分离的iPSC分化的神经干细胞经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的iPSC分化的神经干细胞采用iPSC定向诱导分化法、并通过神经干细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:37℃水浴快速融化冻存神经干细胞,酒精消毒管壁,转入离心管,神经干细胞完全培养基。
低速离心:800 rpm 离心 5 min,弃上清废液(干细胞低转速减少凋亡)。
包被接种:培养基重悬沉淀,接种于 Matrigel 基质胶包被培养瓶。
换液:复苏后 24 h 半量换液(弃一半旧培养基补加新鲜培养基,干细胞不要全换);之后隔天半量换液。
温和消化传代:汇合度 70‑75%;弃培养基,PBS 清洗;干细胞解离酶轻柔消化,镜下监控细胞球松散即终止。
传代分瓶:离心收集细胞,重悬;1:2 传代;避免过度吹打造成干细胞损伤。
冻存鉴定:干细胞专用冻存液冻存;Nestin、Sox2 神经干细胞标志物免疫荧光鉴定,支原体检测。
