iPSC分化的皮质胆碱能神经元是由人iPSC经定向分化获得的胆碱能神经元,主要分布于大脑皮层和基底前脑。这类细胞以乙酰胆碱为神经递质,参与学习记忆和注意力调控,在阿尔茨海默病胆碱能系统退化研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: iPSC分化的皮质胆碱能神经元
组织来源:人iPSC分化来源
细胞形态:胞体圆形或锥形,伸出多个长突起
生长特性:贴壁生长,为终末分化细胞
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:神经元专用培养基,添加B27、BDNF、GDNF、cAMP等营养因子
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每3-4天半量更换培养基
传代特性:为终末分化细胞,不建议传代
包被条件:推荐使用多聚赖氨酸和层粘连蛋白双包被培养皿
质量检测 quality test
实验室分离的iPSC分化的皮质胆碱能神经元经MAP2免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的iPSC分化的皮质胆碱能神经元采用iPSC定向诱导分化法、并通过神经元专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:37℃水浴极快解冻神经元冻存管,酒精消毒外壁,转入离心管,皮质胆碱能神经元成熟培养基。
超低速离心:700 rpm 离心 5 min,最低转速,减少神经元凋亡损伤。
高黏附包被接种:神经元培养基重悬沉淀,接种于多聚‑L‑赖氨酸 + 层粘连蛋白双包被培养板 / 瓶。
半量换液:复苏后 48 h 第一次半量换液,之后每 3 天半量更换新鲜神经元培养基;**严禁全换液**。
⚠️禁止常规胰酶传代:成熟胆碱能神经元不再增殖;一般不消化传代。如需转移:使用神经元温和解离液,极轻柔操作。
无分瓶传代:成熟神经元以原瓶培养为主;不做扩增分瓶,仅维持培养。
冻存 / 鉴定:成熟神经元复苏后不建议再次冻存;培养 7‑14 天后做 ChAT 胆碱乙酰转移酶标志物鉴定,支原体质控。
