iPSC分化的运动神经元是由人iPSC经定向分化获得的运动神经元，位于脊髓前角。这类细胞通过轴突支配骨骼肌实现随意运动，以乙酰胆碱为神经递质，在肌萎缩侧索硬化症(ALS)和脊髓性肌萎缩症(SMA)等运动神经元病研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: iPSC分化的运动神经元
组织来源：人iPSC分化来源
细胞形态：胞体多角形或锥形，伸出长轴突和多个树突
生长特性：贴壁生长，为终末分化细胞
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：神经元专用培养基，添加B27、BDNF、GDNF、cAMP、Shh、RA等营养因子
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每3-4天半量更换培养基
传代特性：为终末分化细胞，不建议传代
包被条件：推荐使用多聚赖氨酸和层粘连蛋白双包被培养皿
质量检测 quality test
实验室分离的iPSC分化的运动神经元经MAP2免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的iPSC分化的运动神经元采用iPSC定向诱导分化法、并通过神经元专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 细胞准备：iPSC 培养至 75‑85% 汇合度，基质胶包被培养板，更换神经诱导培养基，加入 SMAD 通路抑制剂启动神经外胚层诱导，每日换液，培养 6 天Oxford Aca...。
2. 脊髓祖细胞定向：添加维甲酸、Purmorphamine，诱导细胞向脊髓运动神经祖细胞分化，连续 8 天每日更换诱导培养基。
3. 神经祖细胞扩增：去除诱导因子，神经祖细胞扩增培养基培养 5‑7 天，形成神经球。
4. 神经球解离：Accutase 温和消化神经球，吹打制备单细胞悬液，完全培养基终止消化。
5. 成熟铺板：将单细胞接种于多聚鸟氨酸‑层粘连蛋白包被板，添加运动神经元成熟培养基。
6. 长期成熟培养：每 2‑3 天换液，培养 14‑21 天直至长出轴突，形成成熟运动神经元。
7. 质控鉴定：免疫荧光检测 ChAT、HB9、ISL‑1 标志物，合格后可传代或冻存保种PMC。
