iPSC分化的骨骼肌元是由人iPSC经定向分化获得的骨骼肌前体细胞，具有融合形成多核肌管的能力。这类细胞在体外可自发收缩，表达肌球蛋白和肌动蛋白，是研究肌营养不良、肌肉发育和肌肉组织工程的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: iPSC分化的骨骼肌元
组织来源：人iPSC分化来源
细胞形态：长管状多核细胞，可融合形成肌管
生长特性：贴壁生长，可融合形成多核肌管
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：骨骼肌细胞专用培养基，添加FBS、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代特性：为终末分化细胞，融合后不建议传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
包被条件：推荐使用Matrigel基质胶包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的iPSC分化的骨骼肌元经MyoD免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的iPSC分化的骨骼肌元采用iPSC定向诱导分化法、并通过骨骼肌细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 起始诱导：iPSC 汇合 30% 左右，更换中胚层诱导培养基，添加 CHIR‑99021 激活 Wnt 通路，培养 2 天启动旁轴中胚层分化PMC。
2. 体节祖细胞诱导：撤去 CHIR，加入 LDN193189 抑制 BMP 信号，培养基添加 bFGF，培养 4‑6 天获得体节前体细胞。
3. 肌源性祖细胞扩增：更换肌祖细胞扩增培养基，添加 HGF、IGF‑1，扩增至 PAX7 阳性肌卫星样祖细胞。
4. 纯化筛选：流式或免疫磁珠分选 CD56 阳性肌前体细胞，去除非肌类杂细胞。
5. 终末分化启动：撤去增殖生长因子，低血清分化培养基诱导，细胞开始融合。
6. 肌管成熟培养：每 2‑3 天换分化培养基，培养 10‑14 天，形成多核骨骼肌肌管。
7. 鉴定质控：MyHC、MYOG 免疫染色鉴定，镜下观察收缩样肌管，合格冻存。
