二型糖尿病病脂肪干细胞是从二型糖尿病患者脂肪组织中分离的间充质干细胞。这类细胞保留了糖尿病患者的代谢特征，具有多向分化潜能和免疫调节能力，是研究二型糖尿病发病机制、胰岛素抵抗和糖尿病并发症的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 二型糖尿病病脂肪干细胞
组织来源：二型糖尿病患者脂肪组织
细胞形态：长梭形或纺锤形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：间充质干细胞专用培养基，添加FBS、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
体外寿命：可传代培养10-15代，低代数细胞状态最佳
质量检测 quality test
实验室分离的二型糖尿病病脂肪干细胞经CD90/CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的二型糖尿病病脂肪干细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过脂肪干细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 样本预处理：取糖尿病患者脂肪抽吸物，含双抗无菌 PBS 反复洗涤 3‑4 次，去除血液杂质。
2. 组织剪碎：无菌超净台去除可见纤维、血管，脂肪组织剪碎至 1mm³ 细小碎块。
3. 胶原酶消化：加入 I 型胶原酶，37℃摇床 55‑60min 消化脂肪基质。
4. 终止消化过滤：加入等体积完全培养基中和胶原酶；70μm 筛网过滤去除大块残渣。
5. 离心弃脂：1800rpm 离心 10min，小心吸除上层漂浮脂滴，弃上清保留底部细胞沉淀。
6. 接种培养：脂肪干细胞完全培养基重悬沉淀，接种培养瓶，37℃、5% CO₂孵箱静置。
7. 换液传代：48h 首次换液去除未贴壁细胞；每 2‑3 天换液；80‑90% 汇合胰酶消化传代；流式鉴定 CD90/CD105 阳性，CD34/CD45 阴性。
