成真皮成纤维细胞来源于成人真皮层，是皮肤真皮的主要细胞类型。这类细胞合成细胞外基质维持皮肤结构，参与皮肤老化和创伤修复，与新生儿成纤维细胞相比增殖能力较低，是研究皮肤衰老、创伤愈合和皮肤疾病的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 成真皮成纤维细胞
组织来源：成人正常真皮组织
细胞形态：长梭形或纺锤形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列，高密度时呈漩涡状
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：成纤维细胞专用培养基，添加FBS、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:4比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的成真皮成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的成真皮成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 成人皮肤活检样本 PBS‑双抗清洗，完全剔除皮下脂肪。
2. Dispase 4℃过夜消化，分离表皮与真皮，弃去表皮组织。
3. 将真皮组织剪切成细小组织碎片。
4. I 型胶原酶 37℃摇床消化 60min，释放成纤维细胞。
5. 培养基终止消化，70μm 筛过滤，250g 离心 5min 弃上清。
6. 成纤维细胞培养基重悬，接种培养瓶放入孵箱。
7. 隔天换液，细胞长满 80‑90% 进行传代，波形蛋白鉴定纯度。
