新生儿表皮角质形成细胞来源于新生儿表皮层，具有旺盛的增殖和分化能力。这类细胞通过增殖分化形成角质层构成皮肤屏障，在皮肤创伤修复、皮肤发育和先天性皮肤病研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 新生儿表皮角质形成细胞
组织来源：新生儿正常皮肤表皮组织
细胞形态：多角形或扁平形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：角质形成细胞专用培养基，添加KGM-Gold或K-SFM培养基及配套生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.05%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液，37℃消化3-5分钟
包被条件：推荐使用胶原蛋白Ⅳ包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的新生儿表皮角质形成细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的新生儿表皮角质形成细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过角质形成细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 新生儿皮肤样本无菌清洗，剪除皮下多余脂肪组织。
2. Dispase II 溶液 4℃消化过夜，表皮真皮分离。
3. 镊子完整剥离表皮薄片，放入 0.05% 胰酶‑EDTA 中。
4. 37℃水浴消化 10min，吹打打散表皮单细胞。
5. 角质细胞专用培养基终止消化，250g 离心 5min 弃上清。
6. 专用无血清角质形成细胞培养基重悬，基质胶包被板接种。
7. 24‑48h 换液，后续隔天换液；CK14 标志物鉴定细胞。
