肺动脉外膜成纤维细胞位于肺动脉外膜层，是血管外膜的主要细胞类型。这类细胞通过合成细胞外基质参与血管重塑，在肺动脉高压中发生异常增殖和纤维化，导致肺动脉外膜增厚和血管硬化，是研究肺血管重塑的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 肺动脉外膜成纤维细胞
组织来源：人/大鼠正常肺动脉外膜组织
细胞形态：长梭形或不规则三角形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列，高密度时呈漩涡状
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:4比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的肺动脉外膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的肺动脉外膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 无菌分离肺动脉血管，预冷 PBS 冲洗血管腔内外血迹。
2. 显微操作剥离血管最外层外膜组织，剔除血管内皮、中膜平滑肌层。
3. 将外膜结缔组织剪碎至 1‑2mm 细小组织块。
4. I 型胶原酶 37℃振荡消化 60min。
5. 完全培养基终止消化，70μm 筛过滤，250 g 离心 5 min。
6. 成纤维细胞完全培养基重悬沉淀，接种培养瓶孵箱培养。
7. 48h 换液去除漂浮残渣，80% 汇合传代；Vimentin 阳性，α‑SMA 低表达鉴定。
