I型肺泡上皮细胞覆盖肺泡表面约95%面积,构成气血屏障的薄层结构。这类细胞形态扁平,极薄,有利于气体交换,是肺泡气体交换的主要场所,在急性肺损伤、肺水肿和肺纤维化研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: I型肺泡上皮细胞
组织来源:人/大鼠正常肺组织
细胞形态:扁平鳞状或铺展状,胞体较大,覆盖肺泡表面
生长特性:贴壁生长,需依赖细胞外基质支撑
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:上皮细胞专用培养基,添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、角质细胞生长因子(KGF)等生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分钟
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)或Matrigel基质胶包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的I型肺泡上皮细胞经AQP5免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的I型肺泡上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 无菌获取肺组织,预冷 PBS 灌注冲洗肺泡血管血液。
2. 去除大气管,肺实质组织剪碎;胶原酶 + 弹性蛋白酶复合酶 37℃消化 45‑55 min。
3. DMEM 培养基终止消化;100μm 滤网过滤得到细胞悬液。
4. 差速贴壁去除成纤维细胞;免疫磁珠分选 E‑cadherin 阳性上皮细胞。
5. 肺泡上皮专用完全培养基重悬细胞,包被板接种。
6. 48h 首次换液;每 2‑3 天更换新鲜培养基。
7. AQP‑5、PDPN 免疫荧光鉴定 I 型肺泡上皮表型。
