肺巨噬细胞是定居于肺组织的巨噬细胞,是肺部固有免疫的核心效应细胞。这类细胞通过吞噬清除病原体和粉尘颗粒,分泌细胞因子调节肺部免疫和炎症反应,在急性肺损伤、肺纤维化和肺部感染研究中发挥关键作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 肺巨噬细胞
组织来源:人/小鼠/大鼠正常肺组织
细胞形态:圆形或不规则形,伸出伪足
生长特性:半贴壁生长,具有吞噬能力
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:RPMI 1640培养基,添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗、M-CSF
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代特性:为半贴壁细胞,可通过吹打传代
刺激因子:需添加M-CSF维持存活和功能
质量检测 quality test
实验室分离的肺巨噬细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的肺巨噬细胞采用肺泡灌洗法结合贴壁筛选法、并通过巨噬细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 麻醉处死,气管插管,预冷无菌 PBS 进行支气管肺泡灌洗,反复灌洗回收灌洗液PMC。
2. 肺泡灌洗液全部收集入离心管,300g、4℃离心 10 min,弃上清。
3. RPMI‑1640 完全培养基重悬沉淀,充分吹打混匀。
4. 将细胞悬液加入培养瓶,37℃孵箱静置贴壁 2h。
5. 吸除未贴壁悬浮淋巴细胞,PBS 轻洗培养瓶去除残留悬浮细胞。
6. 添加巨噬细胞完全培养基继续培养,每 2‑3 天换液一次。
7. CD68、CD11b 免疫染色鉴定巨噬细胞。
