肺微血管周细胞位于肺微血管基底膜外侧,是肺微血管单元的重要组成部分。这类细胞通过收缩调节肺微循环血流,维持微血管稳定性和通透性,在肺动脉高压、肺纤维化和急性肺损伤等疾病中发挥重要作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 肺微血管周细胞
组织来源:人/大鼠正常肺微血管组织
细胞形态:长梭形或不规则形,伸出多个细长分支
生长特性:贴壁生长,密度低时呈放射状排列
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:周细胞专用培养基,添加FBS、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
包被条件:推荐使用多聚赖氨酸包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的肺微血管周细胞经PDGFR-β免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的肺微血管周细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过周细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
1. 新鲜肺组织预冷 PBS 清洗,剔除大支气管、大血管。
2. 肺实质剪碎,胶原酶 + DNase I 37℃振荡消化 60min。
3. 培养基终止消化,依次经 100μm、40μm 滤网过滤收集悬液。
4. 离心收集细胞沉淀,用 PBS 洗涤 2 次。
5. NG2、PDGFR‑β 免疫磁珠阳性分选纯化周细胞,去除内皮细胞。
6. 周细胞专用培养基重悬,纤维连接蛋白包被板接种培养。
7. 低氧生理氧浓度(10% O₂)培养;NG2 免疫荧光鉴定纯度PMC。
