人肺大静脉内皮细胞分离自肺大静脉组织；肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中，把动脉血由肺送回心脏的静脉，是唯一一个静脉里流动脉血的血管。左右1对，共4条，两条连接右肺，两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接，而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压，是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下，肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点，肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力，要维持肺循环的低压、低阻的状态，必须保证整个肺循环系统的畅通无阻，血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉，再入左心室，经过左心室收缩进入体循环，才能避免肺动脉内压力升高。细胞呈多边形鹅卵石状排列；该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。
产品属性 product attributes
产品名称 人肺大静脉内皮细胞
组织来源 肺大静脉组织
默认种属 人，其他咨询
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 人肺大静脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人肺大静脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的人肺大静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人肺大静脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
1. 无菌手术器械、培养瓶、滤网灭菌；超净台紫外消杀。
2. 配制：预冷 PBS（双抗）、0.1% 胶原酶、内皮细胞专用完全培养基。
3. 样本置于冰盒转运，提前备好插管灌洗耗材。
二、取材与预处理
1. 取人肺大静脉血管，酒精消毒外壁，PBS 冲洗血管腔淤血。
2. 结扎血管一端，从另一端灌入预冷 PBS 反复冲洗管腔，去除血液杂质。
三、细胞分离与消化
1. 血管内灌注胶原酶消化液，两端封闭，37℃孵育 20min。
2. 倾倒管内消化液体，轻柔吹打管壁，收集洗脱细胞悬液。
3. 离心收集细胞沉淀，培养基重悬。
四、纯化与接种培养
1. 细胞悬液过筛，采用内皮细胞专用培养基接种。
2. 差速贴壁去除平滑肌杂细胞，纯化内皮细胞。
3. 37℃CO₂培养，每 2 天换液，镜检铺路石样内皮细胞。
