人源表皮黑色素细胞-Brown来源于棕色肤色个体的表皮基底层，黑色素合成能力较Light型更强。这类细胞通过树突将黑色素体转运至角质形成细胞，决定个体肤色深浅，是研究种族肤色差异、色素异常和黑色素瘤的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源表皮黑色素细胞-Brown
组织来源：人正常皮肤组织（棕色肤色）
细胞形态：梭形或树突状，胞体较小，伸出多个细长树突
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：melanocyte专用培养基，添加FGS、TPA、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
包被条件：推荐使用Ⅰ型胶原蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源表皮黑色素细胞-Brown经Melan-A免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源表皮黑色素细胞-Brown采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过黑色素细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管；酒精擦拭管壁；细胞悬液加入黑色素细胞专用完全培养基；离心弃上清；重悬接种于明胶包被培养瓶，培养箱孵育。
细胞换液：复苏 24 h 换液；PBS 轻洗细胞层；预热新鲜黑色素细胞完全培养基；每 2‑3 天换液一次。
细胞传代：汇合度 70‑75%；弃培养基 PBS 清洗；胰酶‑EDTA 短时间消化 2‑4 min；镜下细胞回缩；黑色素完全培养基终止消化。
细胞消化收集：轻柔吹打瓶壁收集单细胞悬液；离心重悬；传代比例 1:2。
细胞冻存：收集对数生长期低代次细胞沉淀；黑色素细胞冻存液重悬；1‑2×10⁶细胞 /mL；分装冻存管液氮保存。
细胞形态观察鉴定：树突状多突起形态，胞内可见棕褐色色素颗粒；TYRP‑1、S‑100 标志物染色鉴定。
细胞污染应急处理：污染瓶丢弃隔离；超净台灭菌；剩余细胞换液 + 双抗监测。
