人源胚胎神经膜细胞(施万细胞)是周围神经系统的胶质细胞,通过形成髓鞘包裹轴突促进神经冲动传导。这类细胞分泌多种神经营养因子促进神经再生,在周围神经损伤修复、脱髓鞘疾病和神经组织工程研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源胚胎神经膜细胞
组织来源:人胚胎神经组织
细胞形态:长梭形或纺锤形,两端伸出细长突起
生长特性:贴壁生长,密度低时呈放射状排列,高密度时呈平行排列
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:施万细胞专用培养基,添加FBS、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
包被条件:推荐使用多聚赖氨酸包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源胚胎神经膜细胞经S100β免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源胚胎神经膜细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过神经膜细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏:冻存管 37℃水浴速融;酒精消毒外壁;悬液转入施万细胞专用完全培养基;离心弃上清;重悬接种于多聚‑L‑赖氨酸包被培养瓶;37℃培养箱孵育。
细胞换液:复苏 24 h 首次换液;PBS 轻洗细胞单层;预热新鲜施万细胞完全培养基;每 2‑3 天换液一次。
细胞传代:汇合度 80%;弃培养液 PBS 洗涤;胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min;镜下细胞回缩;施万完全培养基终止消化。
细胞消化收集:轻柔吹打瓶壁,单细胞悬液;离心重悬;传代比例 1:2‑1:3;施万细胞增殖速度较慢。
细胞冻存:收集低代次健康细胞沉淀;神经细胞冻存液重悬;1‑2×10⁶细胞 /mL;分装冻存管液氮保存。
细胞形态观察鉴定:双极梭形细胞;S‑100、P0 施万细胞标志物免疫染色鉴定。
细胞污染应急处理:污染样本丢弃隔离;操作台消毒;剩余细胞换液 + 双抗观察。
